光学显微镜的观察方式

更新时间：2024-05-31

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光学显微镜适用于多种检材，如组织切片、活细胞、电路板等。不同检材光学特性差异大，需使用不同观察方式，主要有明场、相差、荧光、偏光、DIC、暗场、霍夫曼相衬七种方式。

一台光学显微镜可能拥有一种或多种观察方式，今天我们先来说说明场观察方式。

（1）成像原理

明场观察是光学显微镜最基础的观察方式，其利用可见光（约400-700nm）作为照明光源，光线相位、照射角度等性质不作改变，直接照射在样品上进行成像。

明场观察有透射照明和反射照明两种照明方式，前者是照明光线透过样品后进入物镜，主要适合有透明度的薄样品；后者是照明光线照射到样品后反射进入物镜，主要适合不透明的厚样品。

（2）关键部件

明场观察不需要特殊的部件，其效果主要受光源和聚光镜影响。光源有两项核心规格，色温和显色性。聚光镜核心规格是数值孔径。

传统以卤素灯等作为光源，其特点是色温偏暖，约3000K，亮度越低色温越暖。人眼观察较为舒适，显色性高，但一般需要在光源处使用 RBD 日光滤光片或蓝色滤光片校正色温，否则对于样本中红染、黄染等细节的分辨很差。主要缺点是发热大、使用不当容易烧，另外用滤色片校正色温会损失光强，对拍照有影响。

使用技巧：关卤素灯光源前先把光强调低。以高光强启动卤素灯容易导致灯泡烧坏，调低光强再关，可以避免下次开灯时意外烧坏灯泡。LED光源则基本不影响，但养成好习惯总是有益的。

目前专业LED光源已逐步成为主流，其色温恒定在5000K左右，接近日光的平均色温，显色性较好，人眼观察和数字相机成像都有较好效果。此外LED光源功耗低亮度高，一般3W LED可以达到30W卤素灯光强，方便即开即用，寿命长，免维护，因此明美大部分显微镜均默认采用LED作为明场光源，卤素灯则作为可选。

卤素灯照明右图LED灯照明

聚光镜会有倍数刻度或者数值孔径刻度，一般调到物镜对应的倍数，或者比物镜数值孔径稍低的数值即可。更精准的调试方式，拔出目镜，边调节孔径光阑边从观察筒观察物镜后焦平面，当画面占视野3/4左右时效果好，但不建议频繁这样操作，因为容易让观察筒进灰。

产品小知识1：除了数值孔径，聚光镜还有消色差、消球差等规格区别，在40X以上会对成像质量有较大影响，所以并不是数值孔径高就等于更好。

产品小知识2：如果您想使用超低倍2X物镜，您需要选配摇出式聚光镜。

（3）成像特点

明场观察能较好地呈现样品色彩，但衬度较低，尤其是透射照明的明场中。在透射照明成像过程中，带有样品信息的光线与背景光线混合在一起，这使样品浅色部分与背景对比度较低，遇到活细胞等透明样品基本看不出细节。因此，该观察方式适合已经染色样品或本身有颜色的样品进行成像。

特点jpg

（4）主要应用

①医学研究：HE、IHC等染色病理切片检验

组织切片

明美研究级生物显微镜ML51-N明场观察样品图

左图：HE 组织病理切片样品右图：IHC 免疫组化样品

②材料分析：金相组织、电路芯片等。

金相显微镜

明美金相显微镜MJ43

明美体视显微镜MZX100拍摄的蜜蜂

（5）明美产品推荐

①生物显微

推荐产品：ML11/ML31/ML41/ML51

生物显微镜

配置白光LED光源，成像明亮清晰
采用无限远光路系统，可灵活升级配置
适用于教学、科研、医学等场景

②金相显微镜

推荐产品：MJ31/MJ33/MJ43/MJ41-LED/MJ42

金相显微镜

可配置LED或卤素灯等光源，满足不同观察习惯
配置长工作距离金相物镜，成像清晰，对比度高
适用于工业、材料学等观察场景

③体式显微镜

推荐产品：MZ62/MZ101

体视显微镜

独立双光路系统设计，成像具有立体感
可配备透射与反射LED光源，适配不同检材
可适用于常规生物医学检验，科研研究和工业检测等高精度观察领域

④显微镜相机

推荐产品：MSX11/ MSX2 /MSX1/MDX

显微镜相机

大靶面尺寸感光芯片，高像素设计，细节成像更清晰
灵敏度高，色彩还原性好
软件易用，可搭配明美及其他品牌显微镜

透射与反射（落射）光路示意图

明美显微镜

生物显微镜

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