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电泳是分离蛋白质和其他物质如核酸、嘌呤、嘧啶、一些有机化合物甚至无机离子的主要技术。目前的大部分电泳是将样品分离到固定介质中的流动相中。聚丙烯酰胺凝胶是主要介质之一。它是一种多孔凝胶,其孔径接近蛋白质分子的大小,提高了蛋白质的分辨率。此外,聚丙烯酰胺凝胶化学稳定性好,重复性强,对pH和温度变化稳定,颜色观察容易。SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)在蛋白质分子量测定、特异性蛋白质检测、菌种鉴定等方面具有操作简单、重现性好等特点,因此广为使用。电泳SDS-PAGE的工作...
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本文摘要蛋白质印迹技术(免疫印迹实验)又称为WesternBlot。它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。WesternBlot主要用于检测或分析蛋白,应用领域集中在基因表达研究、抗体活性检测和疾病诊断等。01蛋白质印?;玖鞒掏?2westernblot步骤样品准备:Tanon连续梯度预制胶(4-20%10孔/15孔/17孔);(4-12%10孔/15孔/17孔)TanonMops/MES电泳缓冲液(粉剂)Tanon预染蛋白MarkerTanon4×LD...
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荧光定量PCR是生物医学中常用的检测核酸病毒的方法之一,由此,这几年PCR仪也成了近几年临床检测和分子生物学研究的主要实验室设备。我们知道CT值是PCR扩增曲线中的重要参数,那么CT值是什么?它与PCR扩增存在什么关系?为什么有的时候基因扩增实验中会出现CT值异常甚至缺少CT值的情况?什么是CT值?在荧光定量PCR扩增实验中,当扩增产物的荧光信号(Fluorescencesignal)达到设定的荧光阈值(FLUORESCENCEthreshold)时的所对应的扩增循环数(Cy...
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标签:细胞细胞培养液氮培养基细胞培养是生命科学实验中的基础实验,在细胞生长过程中,很多因素都会造成细胞生长不良。下面简单归纳一下细胞生长不良的原因及对应的解决方案。常见问题一:为什么细胞解冻后缺少活力,活细胞占比较低?这种现象可能主要由以下几种原因所导致:1.培养物冻存液等质量欠缺。解决方案:a.确保用来制备储存物(冻存液)的起始培养物需要保证其健康、无微生物污染、处于生长对数期后期状态。b.收获细胞时需要小心翼翼,避免细胞损伤。2.储存物冻存方法不当解决方案:a.在液氮冷冻...
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溶剂去除是制药、化学和生物技术行业广泛应用中的过程。尽管使用了多种样品形式和溶剂,但没有一种单一的溶剂去除技术可以提供通用的解决方案。随着冷冻干燥和离心浓缩技术的不断成熟,结合真空泵、冷阱和加热蒸发设备,所开发的新一代高功率冷阱、真空离心浓缩仪等仪器,既提高了蒸发性能又改善了样品完整度,这类仪器还进一步地提升了溶剂回收率,从而减少了蒸发-浓缩过程对环境的影响。只有充分了解离心浓缩仪的基本原理与应用才能更好地在实验中发挥它的作用。溶剂去除的原理在溶剂去除过程中,以热量的形式施加...
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