• <legend id="iausu"></legend>
  • <legend id="iausu"></legend>
    <tr id="iausu"></tr>
    <tr id="iausu"><input id="iausu"></input></tr>

    18934597460
    TECHNICAL ARTICLES

    技术文章

    当前位置:首页技术文章细胞转染效率低的原因

    细胞转染效率低的原因

    更新时间:2022-11-18点击次数:1939
    细胞转染效率低的原因
     细胞转染实验是指将DNA、RNA等外源物质通过电转染或化学转染的方式导入至细胞内的实验方法。不同的细胞系转染难度也各部相同,尤其是对生长条件要求较为苛刻的细胞,比如原代细胞的转染效率会远低于其他细胞。这里, 盘点了一下那些可能导致细胞转染效率低的原因、转染试剂选择指南,以便提升您的细胞转染效率。 

    一、实验条件和操作方法不合规
    正常情况下,做细胞转染实验前需要充足的准备,比如:细胞、DNA、转染试剂、培养基等。除了合规的实验条件以外,还有较为重要的就是实验操作方法,实验是一个较为严谨的过程,所以每一步的操作步骤都要严格按照操作规程和说明书进行操作,才能避免人为原因所造成的失误。
    二、细胞活性不足,细胞密度不足
    细胞的生长状态对细胞的转染效率的影响较大,细胞长势弱或者细胞的铺板密度过低,可能会转染试剂的细胞毒性而导致转染效率过低,甚至转染失败。因此细胞转染时机应在细胞的对数生长期,细胞的铺板密度一般以90%-95左右为宜。
    三、转染的DNA或RNA浓度过低、质量过低
    如果转染质粒的DNA或RNA的纯度不够,其中的其它外源物质可能会干扰细胞造成轻微的细胞毒性,进而影响到细胞的转染效率。正常情况下,用于细胞转染的质粒浓度应大于500ng/ul。在做RNA转染实验时,可以尝试Lip RNAiMAX Transfection Reagent试剂,这类试剂的细胞毒性较低,转染效率较高,并且操作简单易于优化,比较适用于高通量转染。

    四、细胞本身转染难度大 
    细胞转染效率低的原因还跟需要转染的细胞类型有关。细胞类型的不同,转染效率也会有较大差别。尤其是MSC细胞、PSC干细胞、神经干细胞、原代细胞等, 对于一些较难转染的细胞,可以尝试高效率的转染试剂或者使用其他转染方法,灵活变化。比如:使用Lipofectamine  Stem试剂。
    五、转染试剂选择不当
    转染试剂的选择时保证细胞转染效率的关键,低质量的转染试剂可能具有较强的细胞毒性,操作过程繁杂,出现转染效果不稳定等现象,遇到难转细胞系甚至出现转染失败。实验室里经常使用的LIP2000,LIP3000的转染试采用脂质体纳米颗粒技术,能够将转染的效率提升10倍作用,比较适合用于HEK293、原代细胞、干细胞等难以转染的细胞类型,并且还具有可重复性。
            以上总结的是一些常见的影响细胞转染效率的因素,可供实验参考,更多关于细胞转染效率的原因 、LIP3000、LIP2000相关产品需求可进入苏州阿尔法生物网站。
    联系方式

    0512-62956104

    (全国服务热线)

    江苏苏州工业园区星湖街218号生物纳米园A5楼301室

    shaohua_geng@bioalpha.cn

    关注我们

    Copyright © 2025苏州阿尔法生物实验器材有限公司 All Rights Reserved   工信部备案号:苏ICP备20036540号-3

    技术支持:化工仪器网   管理登录   sitemap.xml

    关注

    联系
    联系
    顶部
    五月婷婷六月丁香动漫 <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <文本链> <文本链> <文本链> <文本链> <文本链> <文本链>