便携式显微镜在神经胶质瘤研究实验中的应用

神经胶质瘤是中枢神经系统较为常见的原发性恶性肿瘤。髓样分化蛋白 2 (MD2) 作为 toll 样受体 4 (TLR4) 的辅助受体介导先天免疫反应。然而，MD2在调节胶质瘤进展和免疫细胞浸润中的实际作用仍不清楚?？蒲а芯吭谔教?MD2 是否可以通过介导胶质瘤中的免疫细胞浸润成为独立的预后因素。

实验方法

便携式显微镜采用高清摄影系统成像图片，并支持在线多人同步在线同屏阅片。

实验原理

使用CGGA、TCGA和Rembrandt数据库进行MD2的mRNA表达和DNA甲基化差异分析，并使用Kaplan-Meier绘图仪进行生存分析。应用单变量和多变量Cox回归分析MD2的预后价值，并构建列线图评估MD2的临床价值。然后，利用基因本体论（GO）和京都基因和基因组百科全书（KEGG）分析MD2相关的信号通路。此外，通过 TIMER 和 CIBERSOPT 计算 MD2 和免疫细胞浸润之间的相关性。MD2 表达与巨噬细胞和中性粒细胞浸润之间的相关性通过使用胶质瘤细胞中的小干扰 RNA (siRNA) 敲低 MD2 表达来实验验证。

图 1MD2 胶体表达来实验验证图

结果分析(Result analysis):

 研究发现 MD2 过度表达并与胶质瘤预后不良有关。同时，MD2的高表达可能是胶质瘤中MD2基因DNA甲基化程度较低的结果。此外，单变量和多变量 Cox 回归分析表明，MD2 可能是胶质瘤的独立预后因素。进一步的功能富集分析表明，MD2的功能与免疫反应密切相关。此外，MD2的表达水平与胶质瘤中肿瘤相关巨噬细胞和肿瘤相关中性粒细胞的促肿瘤表型的浸润和极化密切相关。

结论 (Result): 

     结论：这些发现提供了强有力的证据，表明 MD2 可以作为一种有价值的免疫相关生物标志物来诊断和预测胶质瘤的进展。

      这些结果在CGGA数据库和医学机构中得到验证。实验过程中，采集并制作组织样本的免疫组化（IHC方法）切片，使用Ocus切片扫描显微成像系统（芬兰Grundium）进行数字化扫描和图像保存及导出，而后并根据国际标准进行评估分级（图2）

                                         (图 2)

胶质瘤中 MD2 的表达和生存分析。CGGA (A) 、TCGA (B)和Rembrandt (C)数据库中胶质瘤患者MD2 的 mRNA表达差异分析。CGGA (D)、TCGA (E)和 Rembrandt (F) 数据库中 MD2 表达与神经胶质瘤患者总体存活率关联的 Kaplan-Meier  存活图。

组织染色切片进行数字化扫描

 使用 Ocus切片扫描显微成像系统（芬兰Grundium）又对MYD88表达的组织染色切片进行数字化扫描和图像保存及导出，根据标准进行评估分级。

图 4 组织切片扫描显微镜扫描图

 文章结尾得出结论，MYD88对TIICs异常以及M2型巨噬细胞影响的神经胶质瘤患者，具有预后评估价值。

   在这个实验中使用的携式数字病理扫描显微镜采用了智能云技术，用户可在任何有网络的地方远程控制和访问其内部的高清图片，并支持多人实时同屏阅片。便携式显微镜由于体积小巧，可装入个人行李箱中，并支持移动充电；另外便携式显微镜具备强大的内嵌式电脑，不需外配服务器和电脑，可通过移动终端（手机、平板、笔记本电脑）的网页浏览器在地球上任何有网络的地方进行远程数据访问和高清图片共享。

便携式数字扫描显微镜的生物应用领域：

• 病理学（冷冻切片、组织学等）

• 临床研究

• 兽医病理学

• 人工智能诊断

• 海洋科学

• 地质学

• 材料学